1. 為了盡可能延長ACQUITY BEH色譜柱的使用壽命,請密切關(guān)注以下方面:
●水的品質(zhì)(包括水純化系統(tǒng))
●溶劑品質(zhì)
●流動(dòng)相的制備、儲(chǔ)存和使用期限
●樣品、緩沖鹽和流動(dòng)相的溶解性
●樣品質(zhì)量及其前處理
2. 建議通過在工作流程中加入質(zhì)量控制(QC)參比物質(zhì)來監(jiān)控系統(tǒng)的運(yùn)行狀況。
3. 出現(xiàn)問題時(shí),往往只需要糾正一個(gè)不當(dāng)?shù)牟僮鳌?/span>
4. 請務(wù)必記住:
●使用在線過濾器裝置,或者優(yōu)選VanGuard保護(hù)柱。
●盡可能避免使用100%水相流動(dòng)相,以阻止細(xì)菌滋生。
●每24~48小時(shí)更換一次水相流動(dòng)相(如果必須使用100%水相流動(dòng)相)。
●每24~48小時(shí)需將舊的100%水相流動(dòng)相丟棄以阻止細(xì)菌滋生。
●每次向流動(dòng)相A添加5%~10%有機(jī)溶劑,以調(diào)節(jié)梯度曲線。
●用0.2 μm濾膜過濾流動(dòng)相的水相部分。
●維護(hù)水純化系統(tǒng),使其保持良好的工作狀態(tài)。
●盡可能只使用超純水(18 MΩ·cm)和優(yōu)質(zhì)溶劑。使用HPLC級(jí)水,而不是UPLC級(jí)水。
●考慮樣品前處理(如固相萃取、過濾等)。
5. 避免事項(xiàng)(在可能的情況下):
●100%水相流動(dòng)相(如果可能)
●HPLC級(jí)瓶裝水
●“添加"流動(dòng)相,將“新"流動(dòng)相加入到“舊"流動(dòng)相中
●使用舊置的水相流動(dòng)相。切記每24~48小時(shí)徹底沖洗流動(dòng)相儲(chǔ)液瓶,并制備新鮮流動(dòng)相
●磷酸鹽緩沖液與高濃度乙腈(如 > 70%)一起使用,可能會(huì)出現(xiàn)沉淀
6. 請勿在觀察到背壓過高或峰分裂時(shí)便認(rèn)定是由于色譜柱失效所引起。請通過檢查以下問題調(diào)查色譜柱出現(xiàn)故障的原因:
●柱壓
●流動(dòng)相是否長菌、沉淀析出和/或樣品的問題
●峰分叉
●樣品質(zhì)量
●進(jìn)樣溶劑的強(qiáng)度
7. 請牢記,通常ACQUITY色譜柱的內(nèi)徑(1.0、2.1和3.0 mm)比傳統(tǒng)HPLC色譜柱小,因此流動(dòng)相消耗會(huì)慢很多。為了降低流動(dòng)相發(fā)生污染或降解的可能性,每次請僅制備分析所需
的流動(dòng)相并將多余的流動(dòng)相保存在冷藏環(huán)境下。
8. 流動(dòng)相相關(guān)問題:
●是否在使用100%水相流動(dòng)相?能否在流動(dòng)相A中加入少量有機(jī)溶劑?
●是否要使用0.2 μm濾膜過濾水相流動(dòng)相?
●流動(dòng)相配了多久?是否需要在儲(chǔ)液瓶上注明制備日期?
●每24~48小時(shí)需添加流動(dòng)相還是制備新鮮流動(dòng)相?
●水的質(zhì)量如何?水的質(zhì)量最近有變化嗎?水純化系統(tǒng)是如何工作的?上一次維護(hù)是什么時(shí)候?
●是否在使用pH 7的磷酸鹽緩沖液(在此條件下非常容易滋生細(xì)菌)?
9. 樣品相關(guān)問題:
●如果以流動(dòng)相配制的純標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)樣,是否會(huì)出現(xiàn)這些問題?
●如果按照樣品前處理方法(如SPE、過濾等)用水制備標(biāo)準(zhǔn)品,是否仍會(huì)出現(xiàn)這些問題?
●樣品是否隨時(shí)間發(fā)生了變化?