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ACQUITY UPLC和ACQUITY Premier CSH色譜柱的入門指南

更新時(shí)間:2024-10-28      點(diǎn)擊次數(shù):146

  每根ACQUITY CSH色譜柱的色譜柱包裝盒或eCord智能芯片中都隨附COA報(bào)告和性能測(cè)試報(bào)告。COA報(bào)告為是針對(duì)填料的批次測(cè)試報(bào)告,包括填料批號(hào)、填料顆粒鍵和前和鍵合后的分析數(shù)據(jù)、測(cè)試結(jié)果和所用的測(cè)試條件。性能測(cè)試色譜圖提供每根色譜柱的以下信息:批號(hào)、色譜柱序列號(hào)、USP塔板數(shù)、USP拖尾因子、保留因子以及色譜條件。這些數(shù)據(jù)應(yīng)妥善保存,以備將來(lái)參考。

a. eCord安裝

(可能并非所有色譜柱配置都適用。)

  eCord智能芯片按鈕專用于ACQUITY UPLCACQUITY Arc™系統(tǒng),需要裝在儀器柱溫箱模塊的側(cè)面。eCord按鈕經(jīng)過(guò)磁化處理,不需要專門的安裝操作。有關(guān)eCord智能芯片功能的更多信息,請(qǐng)參閱本維護(hù)和使用手冊(cè)第V節(jié)。

b. 色譜柱安裝

(帶或不帶VanGuard FIT保護(hù)柱)

  注:在處理ACQUITY CSH色譜柱和任何化學(xué)品之前,請(qǐng)咨詢您的安全主管部門和/或參照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī),使用適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)裝備。

  ACQUITY CSH色譜柱出廠時(shí)保存于100%乙腈中。下述步驟中給出的流速適用于內(nèi)徑2.1 mm的色譜柱。

1. 灌注泵系統(tǒng),排出含緩沖鹽的流動(dòng)相,然后將色譜柱的入口端連接至進(jìn)樣器出口。

2. 通過(guò)將泵流速設(shè)置為0.1 mL/min,并且在至少5 min增加至0.5 mL/min,用100%有機(jī)流動(dòng)相(甲醇或乙腈)沖洗色譜柱。

3. 當(dāng)流動(dòng)相可從色譜柱出口均勻流出時(shí),停流速,并將色譜柱出口連接至檢測(cè)器。這能防止氣泡進(jìn)入檢測(cè)系統(tǒng)。

4. 按照步驟2所述逐漸增加流速。

5. 一旦柱壓和基線達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài),即可繼續(xù)進(jìn)行下一部分操作。

 

c. 色譜柱平衡

  在更換為其他流動(dòng)相體系之前,務(wù)必確保流動(dòng)相的兼容性。請(qǐng)用至少10倍柱體積的流動(dòng)相平衡色譜柱(色譜柱體積請(qǐng)參見(jiàn)表1)。當(dāng)色譜柱達(dá)到恒定背壓時(shí),可認(rèn)為該柱已達(dá)到熱力學(xué)平衡。

1.不同規(guī)格色譜柱柱體積(mL)(乘以10得到?jīng)_洗色譜柱所用的流動(dòng)相體積)

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  為了避免流動(dòng)相緩沖鹽在色譜柱或系統(tǒng)中發(fā)生析出,請(qǐng)使用5倍柱體積的水/有機(jī)溶劑混合溶液沖洗色譜柱,其中有機(jī)溶劑比例應(yīng)與所需緩沖鹽流動(dòng)相中的有機(jī)溶劑比例相同或更低。(例如,引入60%甲醇/40%緩沖鹽流動(dòng)相之前,應(yīng)使用60%甲醇水溶液沖洗色譜柱和系統(tǒng)。)

 

d. 初始柱效測(cè)定

1. 使用色譜柱之前,需要先進(jìn)行柱效測(cè)試。這項(xiàng)測(cè)試可包括

a. 您所在實(shí)驗(yàn)室常用的混合標(biāo)準(zhǔn)品,和/

b. Waters柱性能測(cè)試報(bào)告中測(cè)試柱效所用的標(biāo)準(zhǔn)品。

  注:如果采用(b)項(xiàng)的分析物進(jìn)行柱效測(cè)試,在等度條件下測(cè)得的柱效可能低于沃特世色譜柱性能報(bào)告中所示的柱效。這種情況是正常的。為了盡可能減小系統(tǒng)體積,沃特世的等度色譜柱測(cè)試系統(tǒng)進(jìn)行了相應(yīng)的改進(jìn)。這對(duì)于色譜柱填充質(zhì)量的考察相當(dāng)具有挑戰(zhàn)性,可確保色譜柱被最好地裝填。

  這些經(jīng)過(guò)改造的特殊測(cè)試系統(tǒng)不再具有商業(yè)可行性,方法的靈活性亦受限,只能用于等度色譜柱測(cè)試。

2. 測(cè)定理論塔板數(shù)(N),并定期對(duì)比該數(shù)值。

3. 按預(yù)定的時(shí)間間隔進(jìn)行重復(fù)測(cè)試,跟蹤色譜柱性能隨時(shí)間的變化情況。所得柱效結(jié)果可能會(huì)有微小差異,這可能是由于連接質(zhì)量、運(yùn)行環(huán)境、系統(tǒng)電子設(shè)備、試劑質(zhì)量、色譜柱條

件和操作員技術(shù)等方面存在差異所致。

 

e. 色譜柱QR

  色譜柱標(biāo)簽上的快速參考卡(QR)碼可提供色譜柱專有信息(即色譜柱的唯一標(biāo)識(shí)符 - P/N和序列號(hào)),這些信息按照廣泛采用的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行編碼。

1. 可使用任何能掃描QR碼的設(shè)備進(jìn)行掃描(即使用智能手機(jī)和平板電腦的內(nèi)置攝像頭應(yīng)用程序進(jìn)行掃描)。

2. QR碼直接鏈接至waters.com的色譜柱信息中心。

3. 獲取關(guān)于色譜柱的技術(shù)信息和專業(yè)信息(即COA報(bào)告和應(yīng)用紀(jì)要)。

 

f. VanGuard保護(hù)柱

  VanGuard™保護(hù)柱專門用于ACQUITY UPLC色譜柱。VanGuard保護(hù)柱是2.1 mm(內(nèi)徑)× 5 mm(長(zhǎng))的保護(hù)柱設(shè)備,專用于ACQUITY UPLC系統(tǒng)。VanGuard保護(hù)柱所使用的填料和篩板與內(nèi)徑2.1 mmACQUITY UPLC CSH色譜柱相同。VanGuard保護(hù)柱可直接連接至ACQUITY UPLC CSH色譜柱的入口端。

  注:為了確保VanGuard保護(hù)柱的連接無(wú)空隙且無(wú)滲漏,在出廠時(shí)未將保護(hù)柱的箍環(huán)和錐箍進(jìn)行永久性固定。取下將這兩個(gè)部件固定至保護(hù)柱管路的O形圈時(shí),必須謹(jǐn)慎操作。

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安裝說(shuō)明

1. 從包裝箱中取出VanGuard保護(hù)柱,然后取下塑料塞頭。

2. 調(diào)整保護(hù)柱方向使其外接頭朝上,小心取下在運(yùn)輸期間用于固定箍環(huán)和錐箍的橡膠O形圈(箍環(huán)和錐箍尚未永久性固定)。

3. 使ACQUITY UPLC CSH色譜柱垂直于工作臺(tái)表面,且色譜柱入口朝下(色譜柱出口朝上)。

4. VanGuard保護(hù)柱從下方插入ACQUITY UPLC CSH色譜柱入口,并用手?jǐn)Q緊(箍環(huán)和錐箍尚未永久性固定)。

5. VanGuard保護(hù)柱推入色譜柱入口后,將組裝好的色譜柱和保護(hù)柱翻轉(zhuǎn)180°,使保護(hù)柱位于上方。

6. 如圖所示(圖1),將兩個(gè)5/16英寸扳手分別置于ACQUITY UPLC CSH色譜柱的平坦部分和VanGuard保護(hù)柱六角螺母(外接頭)處,然后擰緊。

7. 擰緊1/4圈,固定箍環(huán)和錐箍。

8. 松開接頭并檢查錐箍深度,確保錐箍完全固定。經(jīng)適當(dāng)固定后,錐箍深度將與ACQUITY UPLC系統(tǒng)中其他連接相似。

9. 重新連接保護(hù)柱,使流動(dòng)相流經(jīng)保護(hù)柱,檢查滲漏情況。

 

g. VanGuard FIT保護(hù)柱

VanGuard FIT保護(hù)柱專門用于ACQUITY Premier色譜柱。

  對(duì)于帶VanGuard FIT保護(hù)柱的ACQUITY Premier色譜柱,可以使用兩個(gè)3/8英寸扳手更換VanGuard FIT保護(hù)柱。只需用扳手咬合住保護(hù)柱和色譜柱末端螺母的平坦部分,然后逆時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)(見(jiàn)圖2),即可拆下VanGuard FIT保護(hù)柱,然后按照實(shí)驗(yàn)室規(guī)范合理?xiàng)壷谩?/span>

  接下來(lái)可以使用VanGuard FIT保護(hù)柱更換棄置的保護(hù)柱。沿順時(shí)針?lè)较蛴檬謹(jǐn)Q緊新的保護(hù)柱,再用兩個(gè)3/8英寸扳手?jǐn)Q緊。正確密封的位置不應(yīng)超過(guò)手?jǐn)Q緊處的1/4圈。

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